30029 NucView 488 Caspase-3 Assay Kit for Live Cells

下載中心：

Flyer (PDF): Nucview Flyer

MSDS (PDF): MSDS 30029

Protocol (PDF): PI-30029

(PDF): Validated cell lines for NucView 488 with references

產品介紹：

NucView? 488 Caspase-3底物是新奇的細胞膜可滲透性的熒光caspase底物，用來實時監測活細胞中caspase-3活性。即使是同一批樣本，細胞與細胞之間的凋亡率也是不一樣的。結果，在不同細胞中，伴隨著凋亡過程發生的凋亡事件或標志也不同。因此，在單個細胞基礎上檢測這些凋亡事件就很重要。傳統上，caspase活性的檢測使用膜不可滲透性的熒光酶底物如DEVD-R110，或者熒光標記的抑制劑如FLICA試劑。前一種情況需要裂解細胞，因此會妨礙活細胞中caspase活性的檢測。另外，這種caspase試驗只是檢測給定時間內高度異質的細胞群平均caspase活性。后一種情況，盡管FLICA試劑能夠進入活細胞以檢測caspase活性，但是加入染料后最初始的信號才能真實地反映酶活性及凋亡細胞的水平。因為，初始信號以后的檢測要考慮到抑制劑對酶及凋亡細胞本身的潛在影響。

不同于傳統的caspase試驗，NucView? 488 Caspase-3底物檢測單個完整細胞的caspase-3活性，并在檢測過程中不會抑制caspase-3的活性。底物包含熒光DNA染料和DEVD，DEVD的一部分是與caspase-3特異結合的。完整的底物是沒有熒光的，能很快地穿過細胞膜進入細胞質，被caspase-3裂解為具有高度親和性的DNA染料，釋放的DNA染料遷移到細胞核，將細胞核染成亮綠色。如上所述，NucView? 488 Caspase-3底物作為雙功能染料，可以檢測細胞內的caspase-3活性， 也可染色細胞核，顯示細胞核在凋亡過程中經歷的形態學變化。caspase-3活性引起的染色也適用于后續的固定和透化。

試劑盒包含NucView? 488 Caspase-3底物和caspase-3抑制劑Ac-DEVD-CHO，可完成100次流式或顯微試驗（200ul的試驗體積）。試用裝規格所含的試劑可完成25次試驗（200ul的試驗體積）。

試劑盒成分：

NucView? 488 Caspase-3 底物，0.2 mM in DMSO

Caspase-3 抑制劑 Ac-DEVD-CHO，2 mM in DMSO

特點：

·         完整細胞中caspase-3實時檢測: 檢測細胞群中單個細胞的caspase-3 活性。

·         雙功能:  caspase-3 活性和細胞核在凋亡過程中經歷的細胞核的形態學變化同時檢測。

·         簡便 & 快速: 實驗過程十五分鐘且免洗。

·         通用性: 適用于流式細胞儀，熒光顯微鏡，熒光酶標儀 。

·         Fixable: 適用于后續的固定和透化。

NucView? 酶底物技術已申請美國專利8,092,784 and 8,586,325.