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Mix-n-Stain CF 染料抗體標記試劑盒極大地簡化了制備熒光標記抗體,尤其是一抗的標記過程。只需將抗體和CF 染料簡單混合于試劑盒內提供的緩沖溶液中即可,整個混合過程可以在30秒內完成。等待30分鐘后,無需進一步的分離過程,用戶所獲得的熒光標記抗體就足以和市場上一些主要品牌的預標記熒光抗體相媲美。而且用戶完全不需要計算標記過程需要使用多少染料,只要將抗體和試劑盒內提供的全部染料混合即可,用戶總能獲得最佳的標記結果。更重要的是,標記反應可以耐受一些主要的抗體穩定試劑,比如:疊氮鈉,Tris以及低濃度的甘油,BSA和明膠。.
Mix-n-Stain CF 標記試劑盒的另外一個優勢就是Biotium優質的CF 染料家族。大部分CF 染料都比Alexa Fluor?、CY以及其他一些相似的商業化染料更亮,光學穩定性也更好。CF 染料家族的產品眾多,光譜波長覆蓋了整個可見和近紅外區域。因此,在標記商業化的一抗時,用戶在選擇不同的顏色時有很大的自由,從而使得多波長檢測更加容易也更加的經濟。
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| 混合之后即可染色——實驗就是如此簡單! |
圖 2. HeLa細胞先后用偶聯了CF 633 Mix-n-Stain 的?-tubulin IgM(紅色),偶聯了CF 488A的phalloidin(綠色)以及 DAPI(藍色)染色。圖片用Zeiss 510 Meta共聚焦顯微鏡收集.
1、標記的原理是化學性質的還是物理性質的?
答:標記的原理是化學性質的,也就是說染料是通過共價化學鍵的方式與抗體之間進行結合?;瘜W共價鍵的結合方式能夠確保在多重染色的情況下,多種被不同CF染料標記試劑盒標記的抗體之間不會發生染料重分布和遷移。
2、與Invitrogen的Zeon抗體標記試劑盒相比,Mix-n-Stain具有什么優勢?
答:優點主要有四個:1)CF染料是通過化學共價鍵的方式與抗體結合,在多重染色的情況下,能夠消除各種染料在不同抗體間的遷移。2)Mix-n-Stain標記的抗體在儲存緩沖體系中可以保存幾個月的時間,而Zeon只能保持30分鐘。3)Mix-n-Stain中的CF染料使標記的抗體偶合物化學構象改變更少,因為CF染料通過化學鍵直接與抗體偶聯,不像Zenon是通過其他抗體片段與目標抗體偶聯。4)無需計算染料/蛋白樣品比例,只需簡單混合和標記即可。
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Table A. Mix-n-Stain product list
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